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簡要描述：青旗（上海）生物技術(shù)發(fā)展有限公司，總部位于上海浦東新區(qū)，依托本地高校資源，逐步發(fā)展成為以生物技術(shù)為主的研發(fā)、生產(chǎn)、培訓(xùn)為一體的綜合化產(chǎn)業(yè)平臺(tái)，在標(biāo)準(zhǔn)化細(xì)胞庫建立及細(xì)胞藥物前端模型方面成果顯著。公司生產(chǎn)經(jīng)營原代細(xì)胞、細(xì)胞系、ELISA試劑盒、感受態(tài)細(xì)胞和HPLC檢測等科研產(chǎn)品與服務(wù)。我們秉承對(duì)用戶負(fù)責(zé)的態(tài)度，以對(duì)科研的高度嚴(yán)謹(jǐn)，以嚴(yán)格的質(zhì)量控制，為廣大生物醫(yī)學(xué)科研用戶提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)！
更新時(shí)間：2021-05-24
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
瀏覽次數(shù)：374
| 品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | BFN60800695 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 1.5ml凍存管x2 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 僅供科研 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
細(xì)胞名稱 | 人肝癌細(xì)胞BEL-7402 |
| |
貨物編碼 | BFN60800695 | ||
產(chǎn)品規(guī)格 | T25培養(yǎng)瓶x1 | 1.5ml凍存管x2 | |
細(xì)胞數(shù)量 | 1x10^6 | 1x10^6 | |
保存溫度 | 37℃ | -198℃ | |
運(yùn)輸方式 | 常溫保溫運(yùn)輸 | 干冰運(yùn)輸 | |
安全等級(jí) | 1 | ||
用途限制 | 僅供科研用途 2類 | ||
培養(yǎng)體系 | DMEM高糖培養(yǎng)基（Hyclone）+10%胎牛血清（Gibco）+1%雙抗（Hyclone） | ||
培養(yǎng)溫度 | 37℃ | 二氧化碳濃度 | 5% |
簡介 | 人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞株是1974年從臨床肝癌手術(shù)標(biāo)本中建立的。細(xì)胞群體倍增時(shí)間為20小時(shí)。移植到處理過的wistar大鼠中的能形成腫瘤結(jié)節(jié)。細(xì)胞形態(tài)呈上皮樣細(xì)胞。在電子顯微鏡下亦顯示上皮細(xì)胞所具有的橋粒和張力原纖維，與臨床肝癌細(xì)胞相似。分瓶培養(yǎng)第四天時(shí)，其有絲分裂指數(shù)約為7%。BEL-7402細(xì)胞的染色體數(shù)為不足三倍體，有一個(gè)異常的近端著絲點(diǎn)染色體。間接免疫熒光法測BEL-7402細(xì)胞內(nèi)的AFP為陽性反應(yīng)。LDH同工酶譜顯示與成年人肝細(xì)胞不同，而與人胚肝及臨床肝癌相近。 | ||
注釋 | Problematic cell line: Contaminated. Shown to be a HeLa derivative (PubMed=28807831). Originally thought to originate from a 53 year old male patient hepatocellular carcinoma. Registration: International Cell Line Authentication Committee, Register of Misidentified Cell Lines; ICLAC-00549. Doubling time: 20 hours (PubMed=6154311); 31.2 +- 1.1 hours (PubMed=23167424). Transformant: NCBI_TaxID; 333761; Human papillomavirus type 18 (HPV18). Omics: Deep quantitative proteome analysis. Omics: SNP array analysis. Omics: Transcriptome analysis. | ||
STR信息 | Amelogenin:X；CSF1PO:10；D13S317:13.3；D16S539:9,10；D18S51:16；D19S433:13；D21S11:27,28；D2S1338:17；D3S1358:15,18；D5S818:12；D7S820:12；D8S1179:12；FGA:18,21；TH01:7；TPOX:12；vWA:16,18 | ||
參考文獻(xiàn) | PubMed=6154311; DOI=10.1360/ya1980-23-2-236 Chen R.-M., Zhu D.-H., Ye X.-Z., Shen D.-W., Lu R.-H. Establishment of three human liver carcinoma cell lines and some of their biological characteristics in vitro. Sci. Sin. 23:236-247(1980)
PubMed=6275024; DOI=10.1099/0022-1317-57-1-95 Koshy R., Maupas P., Muller R., Hofschneider P.H. Detection of hepatitis B virus-specific DNA in the genomes of human hepatocellular carcinoma and liver cirrhosis tissues. J. Gen. Virol. 57:95-102(1981)
DOI=10.1007/978-4-431-68349-0_4 Alexander J.J. Human hepatoma cell lines. (In) Neoplasms of the liver; Okuda K., Ishak K.G. (eds.); pp.47-56; Springer; Tokyo (1987)
PubMed=1849045 Fuhrer J.P., Xie H., Murphy M.J. Jr., Ye J.N., Yao Z. Characterization of a membrane-associated glycoprotein (gp 43) on human hepatocellular carcinoma by a monoclonal antibody. Cancer Res. 51:2158-2163(1991)
PubMed=14571772 Liu L.-X., Jiang H.-C., Liu Z.-H., Zhu A.-L., Zhou J., Zhang W.-H., Wang X.-Q., Wu M. Gene expression profiles of hepatoma cell line BEL-7402. Hepato-Gastroenterol. 50:1496-1501(2003)
PubMed=23167424; DOI=10.7314/APJCP.2012.13.9.4807 Gu W., Fang F.-F., Li B., Cheng B.-B., Ling C.-Q. Characterization and resistance mechanisms of a 5-fluorouracil-resistant hepatocellular carcinoma cell line. Asian Pac. J. Cancer Prev. 13:4807-4814(2012)
PubMed=23505090; DOI=10.1002/hep.26402 Wang K., Lim H.Y., Shi S., Lee J., Deng S., Xie T., Zhu Z., Wang Y., Pocalyko D., Yang W.J., Rejto P.A., Mao M., Park C.-K., Xu J. Genomic landscape of copy number aberrations enables the identification of oncogenic drivers in hepatocellular carcinoma. Hepatology 58:706-717(2013)
PubMed=28807831; DOI=10.1016/j.jhep.2017.08.002 Rebouissou S., Zucman-Rossi J., Moreau R., Qiu Z.-X., Hui L.-J. Note of caution: contaminations of hepatocellular cell lines. J. Hepatol. 67:896-897(2017) | ||
驗(yàn)收細(xì)胞注意事項(xiàng)
1、收到人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快聯(lián)系。
2、收到人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來，顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止 3-5 小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理。
3、收到人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清。剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到 15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到 80%左右 ，血清濃度還是在 10％。
4、收到人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞時(shí)如無異常情況 ，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML 培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過 80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000 轉(zhuǎn)/分鐘離心 3 分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
5、將培養(yǎng)瓶置于 37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里，存放于 4℃冰箱，以備不時(shí)之需。
6、24 小時(shí)后，人肝癌細(xì)胞BEL-7402細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁，即可傳代。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加 3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn)）PBS 或 Hanks’液洗滌后棄去。加 0.5-1ml 0.25%含 EDTA 的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般 1-3 分鐘，不超過 5 分鐘?？梢苑?/span>入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見細(xì)胞脫落下來，加入 3-5ml 培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過稀，有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
7、貼壁細(xì)胞 ，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37℃，5%CO2 培養(yǎng)。
特別提醒： 原瓶中培養(yǎng)基不宜繼續(xù)使用，請(qǐng)更換新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)。
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